Dl -1, 4- Dithiothreitol 丨 CAS 3483-12-3

DL -1, 4- Dithiothreitol 丨 CAS 3483-12-3 egy kis molekula redukáló szer, amelyet széles körben használnak a biokémiában, a molekuláris biológiában és a biotechnológiában. Alapvető szerepet játszik a fehérjék csökkentett állapotának fenntartásában, különös tekintettel az oxidációra és a diszulfidkötés kialakulására. A DTT sok laboratóriumi alkalmazásnál előnyben részesül, erős csökkentő teljesítménye, specifitása és alacsony toxicitás miatt normál laboratóriumi körülmények között.

1. redukáló szer a biokémiai kutatásban
√ fehérje szerkezet stabilizálása
● A DTT -t általában a fehérjék diszulfidkötéseinek megszakítására használják a cisztin (diszulfid) kapcsolatok csökkentésével a cisztein (tiol) maradékokkal.
● Ez elősegíti a fehérje denaturációját, az újrahasznosítást vagy az elemzést, különösen olyan technikákban, mint az SDS-PAGE, a Western blot és a tömegspektrometria.
√ Enzim aktiválása és megőrzése
● Számos enzim elveszíti az aktivitást a kritikus ciszteinmaradékok oxidációja miatt. A DTT elősegíti az enzimaktivitás megőrzését azáltal, hogy ezeket a tiolokat csökkentett, aktív formában tartja.

2. Minta előkészítése a molekuláris biológiában
√ RNS izoláció
● A DTT -t hozzáadják a lízispufferekhez az RNS extrakció során, hogy gátolják az RNáz enzimeket, amelyekhez az érintetlen diszulfidkötések aktívak maradnak.
● Segít biztosítani a kiváló minőségű RNS-t olyan alkalmazásokhoz, mint az RT-PCR, a QPCR és a transzkriptome szekvenálás.
√ Reverz transzkripció (RT)
● A DTT javítja a reverz transzkriptáz enzimek hatékonyságát a cDNS szintézisében az enzim tiolcsoportjainak stabilizálásával és az optimális aktivitás fenntartásával.

3. Strukturális biológia és fehérje hajtogatási vizsgálatok
● DL -1, 4- ditiothreitol 丨 CAS 3483-12-3 széles körben használják a fehérje hajtogatásában és az újrahasznosítási protokollokban, mivel utánozza a citoszol redukáló környezetét.
● Ez lehetővé teszi a kutatók számára, hogy tanulmányozzák a diszulfid-függő konformációs változásokat, elősegítve a fehérjeszerkezet-funkció kapcsolatok megértését.

4. Sejt- és szöveti lízis
● A lízispufferekbe a sejtek megszakítására szolgál, hogy megvédje a fehérje -tiolcsoportokat az extrahálás során.
● Megakadályozza az oxidatív tárgyakat, és biztosítja a redox-érzékeny fehérjék pontos elemzését.

5. Redox kémia és redox potenciális vizsgálatok
● A DTT egy eszköz egy meghatározott redox környezet in vitro fenntartására.
● Az intracelluláris redukáló körülmények szimulálására használják a redox-érzékeny jelátviteli útvonalakat, például a tioredoxinokat és a glutaredoxinokat magában foglaló vizsgálatokban.

6. DNS és RNS munkafolyamatok
● olyan reakciókban használják, ahol a nukleázok vagy más oxidatív enzimek lebonthatják a nukleinsavakat.
● Segít a tiszta és hatékony DNS\/RNS -manipuláció biztosításában a downstream alkalmazásokhoz, például a klónozáshoz, a transzfekcióhoz és a szekvenáláshoz.

√ Erős és specifikus csökkentő teljesítmény
● DL {{0}}, 4- Dithiothreitol 丨 CAS 3483-12-3 erőteljes redukáló szer, standard redox potenciál –0,33 V, hatékonyan csökkentve a diszulfid kötéseket még alacsony koncentráció esetén.
√ stabilizálja az érzékeny biomolekulákat
● Fenntartja a tiolcsoportok csökkentett állapotát, megakadályozva az érzékeny fehérjék és enzimek oxidációját a tisztítás és az elemzés során.
√ kompatibilis a vizes rendszerekkel
● A DTT vízoldható és hatékonyan működik pufferolt vizes oldatokban, így ideális a biológiai kísérletekhez.
√ Minimalizálja a fehérje -aggregációt
● A helytelen diszulfidkötések csökkentésével a DTT segít megelőzni a fehérje téves hajlítást és az aggregációt, javítva a tisztított fehérjék minőségét és hozamát.
√ alacsony toxicitás laboratóriumi alkalmazásban
● Viszonylag biztonságos kezelni a szokásos laboratóriumi óvintézkedéseket, így előnyben részesítve néhány szigorúbb redukáló szerhez, mint például az -mercaptoetanol (BME), amely illékonyabb és illatosabb.

Következtetés
A DL -1, 4- ditiotreitol 丨 CAS 3483-12-3 alapvető eszköz az élettudományi kutatók eszközkészletében, amely megbízható redukciót kínál a diszulfid -kötések fehérjékben, enzimekben és nukleinsavakban. Széles körű felhasználása a fehérje kémiában, a molekuláris biológiában és a biotechnológiában nélkülözhetetlenné teszi mind a rutin protokollokban, mind a fejlett kutatásokban. Annak ellenére, hogy instabilitása a megoldásban, hatékonysága és könnyű felhasználása biztosítja annak folyamatos szerepét a legmodernebb tudományban.